Osnove mikroskopije: Refrakcija, indeks refrakcije i performanse leće
Refrakcija, indeks refrakcije
Svjetlost putuje pravocrtno između dvije točke u homogenom izotropnom mediju. Pri prolasku kroz prozirni predmet medija različite gustoće dolazi do loma, što je uzrokovano različitim brzinama prostiranja svjetlosti u različitim medijima.
Kada svjetlost koja nije okomita na prozirnu površinu ulazi u proziran predmet (npr. staklo) iz zraka, svjetlost mijenja smjer na granici i tvori lomni kut s normalom.
Izvedba objektivaØ Leće su temeljni optički elementi koji čine optički sustav mikroskopa. Komponente poput okulara, objektiva i kondenzatora sastoje se od jedne ili više leća. Na temelju oblika mogu se podijeliti u dvije glavne kategorije: konveksne leće (pozitivne leće) i konkavne leće (negativne leće). Ø Kada zraka svjetlosti paralelna s optičkom osi prolazi kroz konveksnu leću i konvergira u točki, ta se točka naziva "žarišna točka". Ravnina koja prolazi ovom točkom i okomita je na optičku os naziva se "žarišna ravnina". Postoje dvije žarišne točke: žarište-prostora objekta i žarište-prostora slike.
Osnove mikroskopije - Potpuno povećanje
Totalno povećanje
Ø Preko okulara
Ukupno povećanje=Povećanje objektiva × Povećanje okulara (ako je prisutno srednje povećanje, pomnožite i sa srednjim povećanjem)
Ø Kada je spojen na video
Ukupno povećanje=Objektivno povećanje × Povećanje adaptera × Faktor povećanja video zapisa
Ø Faktor povećanja videa
Veličina dijagonale zaslona/veličina CCD senzora
Osnove mikroskopije - Numerička apertura
Numerička apertura
Numerička blenda, skraćeno NA, kritičan je pokazatelj za procjenu performansi objektiva i kondenzatora (osobito objektiva). NA=n × sin (umnožak indeksa loma n medija i sinusa polovice kuta otvora 2 ). Kut otvora blende, poznat i kao "kutni otvor blende", je kut formiran između točke objekta na optičkoj osi i efektivnog promjera elementa prednje leće objektiva. Što je veći kut otvora blende, to je veći svjetlosni tok koji ulazi u leću-on je izravno proporcionalan efektivnom promjeru leće i obrnuto proporcionalan žarišnoj udaljenosti.
Što je veći indeks loma medija, to je veća NA vrijednost.
Što je veći kut otvora blende, to je veća NA vrijednost.
n=indeks loma medija između objektiva i uzorka
Tipične maksimalne vrijednosti: suhi objektiv (0,9), objektiv uronjen u vodu (1,2), objektiv uronjen u ulje (1,4), specijalni objektiv (1,6)
Osnove mikroskopije - Rezolucija
Rezolucija
Rezolucija, također poznata kao "moć razlučivanja", još je jedan važan tehnički parametar za mjerenje performansi mikroskopa.
Rezolucija=0.61 λ / NA (gdje je λ valna duljina izvora svjetlosti, a NA numerički otvor objektiva)
Razlučivost objektiva vidljivog svjetla određena je dvama čimbenicima: NA vrijednošću leće objektiva i valnom duljinom izvora svjetla za osvjetljavanje. Što je veća vrijednost NA i što je kraća valna duljina svjetlosti osvjetljenja, to je veća razlučivost.
Osnove mikroskopije-(Razpon dubinske oštrine)
Kada koristite mikroskop, fokusiranje na objekt omogućuje jasnu vizualizaciju ne samo točaka na toj žarišnoj ravnini već i unutar određene debljine iznad i ispod nje. Ova debljina prozirnog dijela je dubina polja. Veća dubinska oštrina otkriva punu debljinu uzorka, dok manja dubinska oštrina pokazuje samo tanki sloj.
Cilj 
Cijeli optički sustav: 
